貨號：SLM M08011                  外觀：淡紅色粉末

儲存：2℃-8℃密封保存             保質期:24個月

一.產品說明

　　貼壁細胞低血清培養基M08011（以下簡稱M08011)為成分明確培養基，不含任何動物來源組分，適用于多種貼壁細胞低血清培養和細胞維持。與常規培養基相比，M08011血清使用濃度為3-5%。從8-10%血清濃度，適應到3-5%血清濃度一般需要4-5代，每代培養時間為48-72小時。使用低血清培養基培養的細胞形態略有不同，屬于正?，F象。

二.配制方法

　　1.將培養基粉末加入配置容器。

　　2.量取適量細胞培養用水于配制容器，攪拌15-20分鐘，使其完全溶解。

　　3.將NaHCO₃以2.44g/L的量加入培養液中，攪拌2-3分鐘，使其完全溶解。

　　4.使用1M NaOH或1M HCl調節培養液至所需pH，定容。

　　5.使用0.22μm孔徑濾膜或濾芯正壓過濾，4℃保存備用。

三.使用M08011培養貼壁細胞的適應方法

　　貼壁細胞培養通常使用公開配方的MEM或者DMEM進行培養，使用血清濃度通常為8%-10%。如需要替換成M08011進行培養，需要逐步降低血清用量。

　　不同來源的貼壁細胞株培養特性各有不同，馴化和適應所需代次也有差異，最終使用的血清濃度也有不同。根據我們整理的信息，不同來源的貼壁細胞株基本上都能適應4-5%血清濃度。

　　更低血清濃度的適應也是可以成功的，但是由于個性化的培養基配方對細胞株有篩選作用，最終可能對細胞株的病毒敏感性和病毒產量有較大影響。為了使細胞株能一次性適應成功，降低病毒抗原的生產成本，我們推薦客戶優先使用4-5%的血清濃度進行培養。

　　現介紹一種梯度降低血清的適應方法：

　　準備倍增正常、無外源污染的貼壁細胞株，使用常規MEM或者DMEM進行培養，血清濃度為8-10%。

　　將細胞培養液完全替換為M08011，碳酸氫鈉添加量為2.44g/升，使用血清濃度為6%，以原有MEM或者DMEM培養的接種密度進行接種，連續培養直至細胞倍增正常。

　　然后可以降低血清使用濃度至4%-5%，以原有MEM或者DMEM培養的接種密度進行接種，連續培養直至細胞倍增正常。

　　使用適應好的貼壁細胞株進行病毒抗原生產，如病毒滴度不理想，可以將收獲的第一代病毒液進行續傳，續傳三代以后，一般情況下，病毒毒價會恢復至正常水平。

　　將適應好的貼壁細胞株保種，下次復蘇該細胞時，可以直接使用4%-5%血清濃度的M08011進行培養。

四.部分客戶應用情況