大腸菌群作為一群在一定條件下能發酵乳糖、產酸產氣的需氧或兼性慶氧革蘭氏陰性無芽胞桿菌,可用于評價食品衛生狀況和推斷食品中腸道致病菌污染的可能。據其定義，其最重要的生化特性莫過于發酵乳糖產酸產氣，則在檢驗中，便有了MPN計數法和CFU平板計數法兩種不同方法。關于各類食品的大腸菌群限量值，國家標準多以MPN單位給出，但近年頒布實施的一些標準中，則多以CFU單位給出限值，如乳粉、速凍面米制品等。本文將結合兩種計數方法的原理，對實驗室檢驗人員和質量管理人員普遍關心的MPN與CFU相關性做初步探討。

      1、MPN計數法原理淺析

       MPN是Most Probable Number的簡寫，即最大可能數，是基于泊松分布的一種間接計數法.1915年，McCrady首次發表了用MPN最大可能數法來估算細菌濃度的方法，這是一種應用概率理論來估算細菌濃度的方法.經過近百年的完善與發展，MPN最大可能數法己成為大腸菌群、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、蠟樣芽胞桿菌、阪崎腸桿菌等多種項目的計數方法。

       MPN是利用多個連續稀釋度(一般采用十倍系列稀釋)，每個稀釋度有多個平行發酵管進行試驗，通過其結果的陽性管數分布情況(如0-0-0、2-0-0、3-1-0等)，查MPN表從而得出報告結果的一種計數方式。各種管數對應的MPN值和MPN表都是通過統計學分布公式，經過嚴密的計算過程得出的。每個濃度稀釋液接種的平行管數可以說3、5、10或者更多，平行樣品的數量越多，精確度越高。其中最常用的是接種3個稀釋度，每個稀釋度接種3管平行樣，共計9管，俗稱九管法。

       過仔細閱讀MPN檢索表可知每個常見管數均列出了95%可置信區間，即下限值與上限值。如3-3-0管數情況，查表可知最大可能數為240，其下限為42，上限為1000。可見，MPN單位僅間接的推算出了菌數的最可能數和其可信限，其實質為菌數的范圍值。

      2、MPN計數法的局限性

       2.1平行性和重現性不佳

       本實驗室曾將帶菌樣品同時進行多個“九管發酵”試驗，但得出的MPN結果卻不盡相同甚至差異較大。正是由于其間接計數只反映范圍的原理，導致了同一已知樣品平行計數卻結果不一致的情況。

       2.2相同MPN值不一定可信限相同，相同可信限MPN值也不一定相同

       如同樣是llMPN，不同管數所得到的可信限并不一致，管數1-0-2的可信限為3.6-38，管數1-2-0的可信限為3.6-42。反之，同樣是可信限8.7-94，卻可出現28、29、35、36等多種MPN值。

       2.3數值不連續

       通過MPN查到的結果全部是不連續的結果，這在日常檢驗和質量控制中將帶來不便。如部分產品的限量值為lOOMPN，但表中卻沒有此數(也沒有1、10、1000)。如產品出廠標準是240MPN(管數3-3-0)，想要實現更嚴格的內部控制，則只能通過陽性管數降低而難以直接控制到某確切的MPN數值。

      3、CFU計數法原理淺析

      CFU是Colony Forming Units的簡寫，即菌落形成單位。菌落指微生物在固體培養基上經培養后生長繁殖而形成的能被肉眼所識別的生長物集落，它往往是由一個或一團微生物生長為數以萬計的相同微生物集聚而成的。可見，CFU的實質就是菌落個數。

      4、MPN與CFU相關性初探

       由以上論述可知，CFU實質是一個確定的個數即一個“點”，MPN的實質是一個最可能數和一個范圍，即一個“區間”。一個“點”被包括在多個“區間”內，而一個“區間”又涵蓋了很多個“點”，所以，MPN值與CFU值無法也不可能一一對應。但其原理與相關性可對我們日常檢驗及質量控制工作提供以下指導。

       4.1 MPN的使用

       我們了解MPN的實質后應加強檢驗環節的過程控制盡量確保試驗的準確性，在報告結果環節上要重視相應管數而非只關心MPN值本身。同時，我們應該了解常規樣品最常出現的管數情況(如0-0-0、1-0-0、2-0-0、3-0-0、3-1-0、3-2-0等)，而不應將MPN檢索表中的各種管數情況視為同概率情況(極低概率的管數情況在最新版大腸菌群國標中已經刪除)，若出現0-0-2、0-3-1、3-0-3等不常見管數情況，應開展樣品調查和試驗自查而非盲目報告結果。

       4.2 CFU值與MPN值

       同一樣品，CFU值難以與MPN值相同，但一般而言，CFU值應該至少落在MPN的5%可信限范圍之內，如果不在，即出現了概率小于5%的小概率事件，有理由相信試驗操作或樣品本身可能存在一定問題。

       4.3合理利用上下限

       通過本實驗室的大量試驗數據顯示，通過MPN值的上下限來對應控制CFU是相對合理的，如某產品要求小于lOCFU/g，我們知道當管數為0-0-0時其上限為9.5CFU/g，故實踐中可以認為檢驗結果0-0-0可滿足lOCFU/g的控制要求。當然，這還要受到具體稀釋倍數、試驗操作、培養條件、樣品本身、培養基質量等多種因素影響，只適合實驗操作人員在大量數據支持下對MPN上下限的合理利用。